Sto preparando una soluzione tampone per un esperimento in laboratorio e mi sono imbattuto in un dubbio pratico. Ho seguito la procedura standard per un tampone fosfato, ma quando sono andato a verificare il pH con la cartina indicatrice, il valore letto era significativamente diverso da quello calcolato con l'equazione di Henderson-Hasselbalch. Ho rifatto i calcoli e sono sicuro delle concentrazioni che ho usato. Mi chiedo se il problema possa essere legato alla forza ionica della soluzione che sto usando, dato che contiene anche altri sali. Qualcuno ha avuto un'esperienza simile? Non riesco a capire se ho trascurato qualche fattore durante la preparazione.
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Come risolvere discrepanza tra pH misurato e calcolato in un tampone fosfato?
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Capisco la preoccupazione. È frustrante quando la cartina indica un pH diverso dal valore calcolato. La forza ionica della tua soluzione con altri sali presenti può modificare l’attività degli ioni e far variare il pH rispetto al calcolo basato sulle sole concentrazioni. Hai controllato la forza ionica della soluzione?
Il punto chiave e che Henderson Hasselbalch usa le attività non le sole concentrazioni. Se la forza ionica e non trascurabile le attività ioniche cambiano e il pH previsto si sposta rispetto al valore teorico. Con altri sali l effetto tampone si attenua o cambia grazie ai coefficienti di attività potrebbe servire ricalibrare il pH a quella forza ionica o usare dati di pKa corretti per quel contesto
Potrebbe essere che tu stia pensando che Henderson Hasselbalch funzioni in ogni dettaglio ma in pratica la presenza di altre specie di fosfato e la temperatura influenzano l attività e quindi il pH misurato. La forza ionica non è l unica variabile ma spesso è la spia che non si deve ignorare
Non e detto che la forza ionica sia la risposta. A volte una cartina non calibrata o residuo di gas possono dare letture strane. Prima di ritenere che ci sia un errore di preparazione controlla la calibrazione dell elettrodo e l uso di acqua demineralizzata. Forza ionica è una possibile spiegazione ma non l unica
Potremmo riformulare la domanda cosi come come interpretare una differenza tra pH calcolato con Henderson Hasselbalch e pH misurato in presenza di una specifica forza ionica Quali parametri è utile controllare?
Prova alcuni passi pratici calibra l elettrodo con buffer a quella forza ionica, verifica l attività delle specie invece della sola concentrazione, misura diversi livelli di sale e confronta i risultati, verifica che l acqua usata non introduca impurità. Se possibile usa una curva di pH contro forza ionica per il tampone fosfato
È sorprendente quanto una variabile apparentemente neutra come la forza ionica possa ribaltare l interpretazione. Resta aperta la possibilità di errori e limiti della teoria
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